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微滴式数字PCR技术平台


一.
平台简介

     数字PCR(digital PCR,dPCR)是对传统PCR方法的重新定义。两者之间的关键区别在于测定核酸量的方法,而数字PCR的方法更加准确。PCR是对单个样品开展一个反应;而dPCR的样品被分成很多份,每一份都单独开展PCR反应,这样能够更准确更灵敏地测定核酸量。

     微滴式数字PCR(droplet digital PCRddPCR)是Bio-Rad独特的数字PCR技术。微滴发生是数字PCR中重要的一环,它将含有核酸分子的反应体系“分割”成数万个纳升级的微滴,核酸分子在各微滴中随机分装,每个微滴或不含待检核酸靶分子,或者含有至少一个待检核酸靶分子,且每个微滴都是一个独立的PCR反应器。

然而,利用移液器来产生微滴是一件费时费力的工作,而不同用户之间移液习惯的千差万别又会造成最终的数据不一致。而AutoDG仪器能够快速、重复且可靠地产生微滴,并且AutoDG仪器有其自己的罩子和HEPA过滤器,可减少污染。

     AutoDG仪器配合QX200微滴分析仪(Droplet Reader)使用。经PCR扩增后,微滴分析仪逐个对每个微滴进行检测,有荧光信号的微滴判读为1,没有荧光信号的微滴判读为0,根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。

ddPCR可对DNA或RNA分子采用绝对定量的方式进行分析,具有无可比拟的精确性,不再需要标准曲线。ddPCR大大提升了数字PCR技术的可扩展性与实用性。

二.平台优势

1、绝对定量,不依赖Ct值,无需标准曲线

2、超高灵敏度,适用于稀有序列及稀有突变的检测

3、精准的定量结果和极佳的重复性

4、适用复杂样品检测,不易受PCR抑制物影响

5、安全无创,只需外周血,不会对受检者造成任何伤害,无年龄、性别限制,可随时进行检测

6、兼容染料法和探针法,同时满足科学研究和临床检测要求

三.平台技术服务

检测项目

应   用

EGFR(G719X、19del、T790M、L858R)突变检测

吉非替尼/厄洛替尼/阿法替尼/奥西替尼

HER2扩增

曲妥珠单抗/帕妥珠单抗/拉帕替尼

MET扩增

吉非替尼/克唑替尼

BCR-ABL融合基因检测

白血病疗效监测和复发监控

IDH1/2突变检测

脑胶质瘤预后预测

ctDNA甲基化

肝癌早筛早诊

微小残留灶MRD监测

肿瘤治疗的伴随诊断/复发监测

低频突变检测

低丰度DNA模板定量/嵌合体突变检测